使用色譜柱常見的幾個問題怎么解決?在我們實驗室中色譜柱的使用一直是非常重要的,而色譜柱的使用需要一定的知識儲備,如果對于色譜柱的使用不了解的話,就很容易出現(xiàn)各種問題,影響實驗的進(jìn)程,那么使用色譜柱常見的幾個問題怎么解決?下面就給大家詳細(xì)介紹一下。
色譜柱的使用容易遇到的問題及解決方法:
1、同一根色譜柱在分析完三聚氰胺后,再分析苯甲酸、山梨酸、糖精鈉時為什么保留時間會提前?
答:色譜柱被強(qiáng)保留物質(zhì)污染后,保留時間提前和滯后的情況都有,具體要看污染物的性質(zhì),還要看分析物、固定相和污染物三者共同作用的情況,情況比較復(fù)雜,有時候比較難預(yù)測是提前還是滯后。不過你平時維護(hù)的時候,注意在測定后將污染物用有機(jī)溶劑反沖清洗,就可以減輕或避免這種情況的出現(xiàn)。建議每個分析方法用專門的色譜柱,長遠(yuǎn)看,這樣更節(jié)省色譜柱的費用。
2、多個樣品不好不離的時候,請問該怎么通過選擇合適的柱子來提高分離度?
答:提高分離度可從三個主要影響因素來考慮,柱效、選擇性和保留因子??赏ㄟ^減小填料粒徑和增加柱長提高柱效;選擇性和固定相選擇以及pH條件有關(guān),通過選擇合適的色譜柱和合適的pH,可以提高選擇性;有時候適當(dāng)延長出峰時間增加保留因子,也可提高分離度。
3、普通的C18柱能作為正相色譜柱使用嗎?正相色譜體系中最常用也最普通的是那種色譜柱。正相柱在使用過程中與反向柱相比有什么需要注意的地方?
答:普通C18柱作為正相柱使用,我還沒聽說過。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動相的極性大,反過來,流動相極性大就是反相。C18固定相屬于疏水性相對比較強(qiáng)的,疏水性強(qiáng)就是極性很弱,應(yīng)該找不出極性比它更弱的流動相了。
正相體系常見的柱子有:硅膠柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱,最普通的應(yīng)該就是硅膠柱。正相柱和反相柱比,最需要注意的是水分,正相柱對水分非常敏感,流動相中水分含量的些微變化對保留時間影響很大,因此正相柱測定前平衡時間需要幾個小時甚至更長。