液相色譜儀常見錯誤操作有哪些?液相色譜儀的操作是需要一定的指示儲備的,如果對于液相色譜儀的了解不多,在使用過程中就會出現(xiàn)一些常見的錯誤操作,導(dǎo)致實驗結(jié)果不準(zhǔn)確,那么液相色譜儀常見錯誤操作有哪些?下面就給大家詳細介紹一下。
液相色譜儀常見錯誤操作:
梯度洗脫的流動相選擇不當(dāng)
要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶,超出范圍后就不互溶,使用時更要引起注意。
當(dāng)有機溶劑和緩沖液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
忽略的空白梯度洗脫
梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現(xiàn)性。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質(zhì)峰,因為弱溶劑中的雜質(zhì)富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需徹底脫氣,以防止混合時產(chǎn)生氣泡。
忽略了溶劑混合所帶來的粘度變化
混合溶劑的粘度常隨組成而變化,因而在梯度洗脫時常出現(xiàn)壓力的變化。例如甲醇和水粘度都較小,當(dāng)二者以相近比例混合時粘度增大很多,此時的柱壓大約是甲醇或水為流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱能承受的最大壓力。
調(diào)節(jié)流速太快