液相色譜儀分離效果不好是什么引起的?在我們使用液相色譜儀的過(guò)程中,經(jīng)常出現(xiàn)儀器效果不好的問(wèn)題,特別是液相色譜儀分離效果不好還會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程,很多人都不知道其中的原因,那么液相色譜儀分離效果不好是什么引起的?下面就給大家詳細(xì)介紹一下。
液相色譜儀分離效果不好可能是以下原因引起的:
1、流動(dòng)相因素
流動(dòng)相pH
不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無(wú)定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg·L-1,且在pH 1~9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量,考慮到溶解速度的影響,對(duì)于硅膠基質(zhì)的填料,其所能承受的流動(dòng)相pH范圍約為1~8。
流動(dòng)相變質(zhì)
當(dāng)前使用最為廣泛的是硅基鍵合相填料,當(dāng)以水溶液作為流動(dòng)相或流動(dòng)相中含有一定濃度的磷酸鹽緩沖液時(shí),水溶液中或緩沖鹽溶液中會(huì)滋生出一些細(xì)菌或霉菌,從而堵塞固定相顆粒間的空隙。特別是對(duì)于多元自動(dòng)比例混合的高效液相色譜儀來(lái)說(shuō),水相或緩沖鹽相獨(dú)立存貯,因存放時(shí)間較長(zhǎng)而容易發(fā)生此類問(wèn)題。
流動(dòng)相純度
目前,廣泛使用的填料顆粒粒徑范圍在3~10μm,孔徑在6~10nm,色譜柱在使用中會(huì)有大量的流動(dòng)相通過(guò),如流動(dòng)相含有微量不溶性雜質(zhì)顆粒,則很容易在柱頭部位被截留,久而久之,造成色譜柱機(jī)械性堵塞,引起柱壓升高而無(wú)法正常使用。
2、樣品因素