我們知道，分光光度法的最重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結(jié)果，準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析結(jié)果的不可靠性與偶然誤差和系統(tǒng)誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度，可通過足夠數(shù)量測量的統(tǒng)計處理來減少;系統(tǒng)誤差影響測量結(jié)果的準確度，可在大體相同實驗條件下，用比較一種物質(zhì)的準確測量結(jié)果，使系統(tǒng)誤差統(tǒng)一起來。而分光光度計的系統(tǒng)誤差對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關于操作誤差，多數(shù)情況下，通過嚴格按操作程序測量、儀器調(diào)零、準確稱量等來控制或減少這種誤差的產(chǎn)生。關于儀器的系統(tǒng)誤差，可通過對分光光度計的定期校正來克服，若所需準確度很高的測量，則必須天天校正。

校正內(nèi)容：

1.波長的準確度試驗以儀器顯示的波長數(shù)值與單色光的實際波長值之間誤差表示，應在±1.0nm范圍內(nèi)?？捎脙x器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。

2.吸收度的準確度試驗

3.雜散光的試驗

4.波長重現(xiàn)性試驗

5.分辨率試驗

吸光度的校正方法：

校正吸光度常用一很純物質(zhì)一定濃度的溶液為標準，且此溶液的吸光度系數(shù)經(jīng)不同實驗室核對，為了使標準液吸光度不受測定波長的微移動而有改變，常選擇具有較平滑吸收高峰的物質(zhì)，同時要求溶液穩(wěn)定，且在相當?shù)牟ㄩL范圍內(nèi)吸收度的改變符合Beer-Lambert定律，常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是最常用的標準溶液，此溶液在紫外區(qū)和可見區(qū)均適用。

波長或波數(shù)的校正方法：