哪些化學(xué)因素會(huì)影響色譜柱的性能,做好防護(hù)才能用的更好[行業(yè)熱點(diǎn)]
哪些化學(xué)因素會(huì)影響色譜柱的性能?色譜柱是我們實(shí)驗(yàn)室常用的一種產(chǎn)品,但是它很容易受到外界影響,所以我們要想要用好色譜柱,就要會(huì)排除色譜柱的干擾,那么哪些化學(xué)因素會(huì)影響色譜柱的性能?下面就給大家詳細(xì)介紹一下。
影響色譜柱性能的化學(xué)因素
(1)鍵合類型及鍵合相
鍵合相分子與基體單點(diǎn)相連為單體鍵合,這種鍵合方式可以提高傳質(zhì)速率,縮短柱平衡時(shí)間,;聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點(diǎn)相連,這種鍵合方式可以增加色譜柱穩(wěn)定性,增加載樣量。而鍵合相不同會(huì)直接影響化合物的保留行為。
(2)碳覆蓋率
高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現(xiàn)性,但分析時(shí)間長(zhǎng)。
(3)封端
硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基,如圖封端可以減輕待測(cè)組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng),改善保留和峰行,這對(duì)于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術(shù)也會(huì)直接影響色譜柱的效能。
建立新化合物分離分析方法的色譜柱選擇
根據(jù)目標(biāo)分析物的分子量大小、溶解性、Pka值,以及分離要求、儀器、成本等各方面來(lái)選擇色譜柱。
(1)根據(jù)分離目的選色譜柱,對(duì)映體分離常選擇手性柱,離子化色譜可選擇離子柱,蛋白多肽、DNA可選擇凝膠柱或離子交換柱,一般的小分子化合物可選擇普通反相柱,如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2)根據(jù)實(shí)際需求和設(shè)備選擇填料粒徑,普通HPLC一般選擇5μm或3.5μm粒徑的色譜柱,而UPLC則常使用1.7μm——3.5μm的色譜柱。
(3)比表面積,高比表面積有助于分離,低比表面積更適合梯度洗脫程序。
(4)孔徑,大分子化合物適合大孔徑,在保證比表面積的前提下,選擇孔徑大的。
以上就是色譜柱一些干擾因素,這類化學(xué)干擾我們平時(shí)很難注意到,所以要在了解之后才能做到排除化學(xué)干擾,這也是對(duì)于實(shí)驗(yàn)室工作人員的基本要求。如需繼續(xù)了解色譜柱相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊,歡迎閱讀《色譜柱為什么不能直接用純水沖洗,色譜柱維護(hù)保養(yǎng)做法[今日熱點(diǎn)]》。
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