液相色譜儀中樣品殘留有哪些解決辦法？在科學(xué)實驗中，任何一項異常都會導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)的結(jié)果偏差，甚至?xí)绊懙胶罄m(xù)的分析，液相色譜儀是儀器中常用設(shè)備之一，殘留物的存在一直常見于實驗中，那么你知道液相色譜儀中樣品殘留有哪些解決辦法嗎？接下來隨著天恒儀器小編一起來學(xué)習(xí)一下吧！

　　1.分類結(jié)轉(zhuǎn)。

　　第一經(jīng)典殘留物觀察到的結(jié)果是，當(dāng)空白連續(xù)注射時，殘留峰的大小有規(guī)律地減小。例如，第一個空白峰可能是原始大小的1%，然后下一個空白峰又下降了100倍。這種承載通常是由流路中的機(jī)械區(qū)域引起的(例如，閥頭中的兩個表面，管道插入其中，螺母被型鍛)。在空白進(jìn)樣期間，一些樣品的保留會逐漸稀釋，導(dǎo)致每次空白運行期間的殘留量逐漸減少。

　　第二連續(xù)結(jié)轉(zhuǎn)-不是真正的結(jié)轉(zhuǎn)。所有樣品和空白總是有一個小峰值，不會隨著每次空白運行而減少。這是一些污染源造成的。如果污染物峰值似乎隨著空白進(jìn)樣量的增加和減少而增加或減少，則空白很可能被污染。如果不是，污染源在系統(tǒng)的其他地方。

　　第三，考慮“空注”操作的重要性。島津自動進(jìn)樣器提供獨特的空采樣能力，無需采樣或旋轉(zhuǎn)自動進(jìn)樣器的采樣閥或高壓閥即可開始色譜操作。這個簡單的測試可以幫助確定問題的根源是否是注射事件本身。不產(chǎn)生不符合要求的峰的空運行必須表明自動進(jìn)樣器進(jìn)樣事件是問題的根源。它不能證明自動進(jìn)樣器中殘留物的來源，但它確實將問題縮小到了高壓閥(人乳頭瘤病毒)、其接頭和連接色譜柱的出口管。由于島津自動取樣器采用針流道設(shè)計，

　　2.更換空白并改變注射量。

　　一件重要的事情是排除空白本身是否可能被污染。檢查的一個簡單方法是使用不同的基質(zhì)來源來制備新的空白(即溶劑本身可能被污染)。此外，改變進(jìn)樣量也有幫助——如果空白的進(jìn)樣量增加，殘留峰的峰面積也增加，則強(qiáng)烈表明空白被污染。如果您注意到殘余峰的大小保持不變，則殘余物很可能位于針頭外部(請參考外部自動進(jìn)樣器沖洗說明)。如果您注意到殘余峰的大小隨著每次后續(xù)注射而減小，則殘余物很可能位于針和/或樣品環(huán)內(nèi)(請參考沖洗內(nèi)部自動進(jìn)樣器的說明)。

　　3.不包括色譜柱。

　　色譜柱可能是殘留物的來源，尤其是當(dāng)隨著時間推移出現(xiàn)結(jié)垢時。重復(fù)注射含有耐火材料或強(qiáng)保留成分的樣品，每次注射都會慢慢改變色譜柱粘結(jié)相的特性。梯度條件可能無法有效清潔此類材料的色譜柱，隨著時間的推移，問題可能會惡化。問題列的一個簡單測試是將其從系統(tǒng)中移除，并用零死體積替換。正常運行樣品，注意沒有色譜柱保留和區(qū)分樣品成分。跟著它跑一兩次。結(jié)轉(zhuǎn)是否繼續(xù)？如果是，問題就和硬件有關(guān)。如果沒有，問題出在柱子上，你應(yīng)該換掉它。另一個實驗可以顯示柱子是否產(chǎn)生殘留物。創(chuàng)建一個方法，使泵通過雙梯度，如下圖所示。從注射開始。該程序從低強(qiáng)度洗脫液條件轉(zhuǎn)移到高強(qiáng)度洗脫液條件，以高強(qiáng)度沖洗色譜柱，然后返回初始條件幾分鐘。然后重復(fù)相同的梯度，但不會發(fā)生新的注射。以這種方式，柱床通過溶劑強(qiáng)度梯度，以觀察殘余峰是否再次產(chǎn)生。如果是，這可能表明填充床或入口篩板是交叉污染的來源，這可能需要更主動和更頻繁的柱沖洗。

　　4.檢查流路接頭。

　　程序通常僅限于人乳頭瘤病毒的連接器和檢測器下游的所有連接器。不銹鋼接頭幾乎沒有問題，但是PEEK接頭和管道在高壓下會滑動。例如大于約4000磅/平方英寸。你可以用扳手稍微擰緊不銹鋼配件來檢查它們。聚醚醚酮接頭和管道的最佳方法是關(guān)閉泵，松開每個接頭，將管道牢牢推到噴嘴底部，然后重新擰緊接頭。

　　5.檢查自動進(jìn)樣器沖洗階段的溶劑。

　　吹掃自動進(jìn)樣器，這是一個預(yù)防性步驟，以確保通向自動進(jìn)樣器的所有沖洗管線都用沖洗溶劑計量，而不是用空氣填充。由于管道中的空氣，針頭或密封件可能沒有被正確沖洗。

　　使用新鮮的沖洗溶劑-用新批次的溶劑替換沖洗階段的溶劑，并用干凈的溶劑替換沖洗階段的容器。更換沖洗溶劑后，在沖洗或沖洗循環(huán)中循環(huán)自動進(jìn)樣器幾次，以確保前一沖洗階段的所有溶劑痕跡都已清除。

　　調(diào)整沖洗階段的強(qiáng)度。

　　強(qiáng)洗階段是對導(dǎo)致殘留物的樣品成分具有親和力的階段。對于強(qiáng)有機(jī)溶劑的反相色譜，在洗滌混合物中使用更多的有機(jī)溶劑，以確保有效洗滌。通常，使沖洗階段的化學(xué)物質(zhì)與流動相的強(qiáng)度大致相等是有效的。有時值得考慮使用100%強(qiáng)溶劑(通常是乙腈或乙醇)。異丙醇是許多應(yīng)用的優(yōu)秀洗滌溶劑，例如脂肪酸，并且已經(jīng)證明在去除污染物方面比甲醇或乙腈更有效。

　　c.調(diào)節(jié)沖洗的酸堿度。

　　考慮到漂洗階段的pH值是一種化學(xué)“強(qiáng)度”。在某些情況下，殘留分析物可能對洗滌階段的酸堿度非常敏感。避免使用酸堿度緩沖液或鹽來沖洗混合物，否則蒸發(fā)后會留下殘留物。切勿使用磷酸鹽緩沖液。使用揮發(fā)性pH調(diào)節(jié)劑，如LCMS流動相，如甲酸、乙酸、甲酸銨、乙酸銨或氫氧化銨。通常0.1-1%體積的溶液就足夠了。嘗試在洗滌溶劑中加入酸或堿，看看殘留物是否得到改善。6.啟用自動取樣器沖洗機(jī)制。

　　在注射前后啟用針頭沖洗。有關(guān)沖洗類型和操作原理的具體信息，請參考本文件末尾的部分。多種沖洗選項允許將強(qiáng)/弱沖洗化學(xué)品組合用于外部針頭表面沖洗和內(nèi)部注射機(jī)構(gòu)沖洗。

　　7.更換硬件:更換針頭、針頭墊片、注射環(huán)或人乳頭瘤病毒轉(zhuǎn)子。

　　如果仍在嘗試解決剩余問題，則問題很可能與自動進(jìn)樣器硬件有關(guān)。此時，您應(yīng)該更換零件，直到發(fā)現(xiàn)問題。通常，最簡單的第一步是嘗試手動進(jìn)樣閥，或者用不接觸目標(biāo)化合物的自動進(jìn)樣器替換自動進(jìn)樣器。如果這些方法中的任何一種解決了問題，就可以確認(rèn)問題出在自動進(jìn)樣器上，值得沿著這條路線進(jìn)行進(jìn)一步的故障排除。如果您還沒有這樣做，請更換自動進(jìn)樣器人乳頭瘤病毒上的針頭墊圈，這在許多情況下是罪魁禍?zhǔn)住Ｈ绻@不起作用，考慮更換針頭和樣品環(huán)。

　　由于樣品和進(jìn)樣溶劑的特性，有時樣品會吸附在樣品環(huán)上。用不同的組合替換循環(huán)可以幫助解決這個問題。注射環(huán)由不銹鋼和聚醚醚酮制成。新的環(huán)材料和不同注射溶劑的組合應(yīng)消除樣品在環(huán)上的吸附。

　　第三，作為做生意的正常結(jié)果，人乳頭瘤病毒的內(nèi)部構(gòu)件會隨著時間的推移而磨損。磨損的轉(zhuǎn)子可能是殘留物的來源，但它通常會影響色譜峰的質(zhì)量?？紤]修理或更換人乳頭瘤病毒。

　　8.解決具體樣品的遺留問題。

　　到目前為止，已經(jīng)嘗試了所有簡單的方法來解決剩余的問題，因此值得花時間檢查問題是否針對您的樣品。有時，您可以通過檢查樣品中的另一個峰來進(jìn)行檢查。例如，如果您的方法使用內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，請嘗試注入大量內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，然后注入沒有內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)的空白。也許你可以注射另一種化學(xué)相關(guān)的化合物，在目前的方法條件下會被洗脫。如果所有其他方法都失敗，您可以更換流動相或色譜柱并運行另一種方法。如果您發(fā)現(xiàn)殘留問題在不同的化合物或方法條件下很常見，則很可能是與自動進(jìn)樣器硬件或系統(tǒng)流程相關(guān)的物理問題。

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　　綜上所述就是小編為大家簡介整理的液相色譜儀中樣品殘留有哪些解決辦法，以上就是液相色譜儀完整的一個解決方法，在出現(xiàn)樣品殘留物時首先要看是哪個地方出現(xiàn)的，分析其原因，在進(jìn)行解決，以免發(fā)生干擾。感謝大家的仔細(xì)閱讀，如需了解其他相關(guān)訊息閱讀《影響液相色譜儀分離度的因素，看完本文你就明白了【全網(wǎng)解說】》